Thèses de doctorat

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Browsing Thèses de doctorat by Author "BOUALEG Imène"

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    Contribution à l’étude des protéines allergènes hydrosolubles de l’arachide
    (2017) BOUALEG Imène
    Dans ce travail, il est étudié la fraction protéique hydrosoluble de l’arachide crue et grillée. Pour les dosages, il est utilisé la méthode de Kjeldhal P (%) = N (%) x 6, 25 et celle de Bradford. Pour l’identification des protéines et des composés protéiques immunoréactifs, la purification et le fractionnement, il est employé l’électrophorèse bi- et mono-dimensionnelle, les immunoempreintes (1D), la spectrométrie de masse (LC-MS/MS) et l’interrogation de la base de données Uni-Prot, la chromatographie de filtration sur gel de Sephadex G-75 et la chromatographie sur gel de DEAE-Cellulose échangeuse d’anions. Les teneurs en protéines totales, insolubles et solubles dans l’eau sont consécutivement 45,49 %, 36,65 % et 9,99 %. Il est identifié l’Ara h1, l’Ara h2, l’Ara h3 et l’Ara h6. Les entités moléculaires mises en évidence sont caractérisées par des Mr faibles et des pHi acides ou neutres. L’isoforme P41B (Ara h1) et la conarachine monomère de l’Ara h1 sont résistants au grillage à 140°C pendant 40 min. Contrairement à la glycinine (Ara h3) et à la conglutine (Ara h6), l’isoforme P17 (Ara h1) et la conglutine-7 (Ara h2) sont sensibles au traitement thermique appliqué. L’isoforme P41B et la conarachine sont sources d’allergie. Les peptides solubilisés provenant de la protéolyse naturelle de l’Ara h2 ne renferment pas les épitopes permettant la liaison IgEs-Ara h2. Il est démontré que les séquences peptidiques NNFGKLFEVK et NEGVIVKSKEHVEELTKHAKSVSK, SSDNEGVIVK et REREEDWRQP sont successivement les épitopes de l’isoforme P41B, de la conarachine et de l’isoforme P41B et la conarachine. Ces variants antigéniques ne sont pas dégradés par le grillage de l’arachide à 140°C pendant 40 min. Ce processus n’a pas d’effet sur l’allergénicité de l’isoforme P41B et la conarachine.