Immobilisation de la lipase de Candida rugosa sur la résine Amberjet 4200Cl Optimisation de l’énantioselectivité par la méthode des surfaces de réponse
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Date
2010
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Abstract
Ce travail décrit l’immobilisation de la lipase de Candida rugosa (CRL) sur une résine anionique,
l’Amberjet 4200ClTM , et particulièrement l’effet des conditions expérimentales d’immobilisation
sur l’activité et l’énantiosélectivité de la CRL immobilisée. Nous avons mené notre étude sur une
réaction modèle, l’acylation du 1-phényléthanol racémique par l’acétate de vinyle. Les facteurs
influençant potentiellement l’immobilisation (température, pH, volume et concentration du
tampon, temps, vitesse d’agitation et rapport enzyme/support) et leur impact sur le
fonctionnement de la CRL immobilisée, en particulier sur son énantiosélectivité, ont été étudiés
par la méthode des plans d’expériences.
Le plan de criblage de Plackett et Burman utilisant un modèle de premier degré a permis de
dégager 3 facteurs les plus influents parmi les 7 facteurs initiaux, et a montré qu’un modèle de
second degré est nécessaire pour décrire le phénomène étudié. Pour ce faire, il a été fait appel au
plan de Box-Behnken. Le modèle de second degré provenant de ce plan a permis la détermination
des conditions expérimentales pour une énantiosélectivité optimale par la méthode de surface de
réponse (RSM). La valeur de l’énantiosélectivité estimée par le modèle est en parfait accord avec
celle trouvée expérimentalement.