Immobilisation d’enzymes dans des membranes polymériques en vue d’élaborer des capteurs biologiques pour la détection des polluants organiques
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Date
2015
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Abstract
Ce travail propose le développement d’un biocapteur impédimètrique utilisant une
enzyme bactérienne (la lipase de Candida rugosa) immobilisée dans une matrice organique
composé de BSA et de glutaraldéhyde. L’objectif principal de cette présente étude est
d’étudier la possibilité d’élaborer un biocapteur capable de détecter les pesticides
organochlorés à l’état de trace dans les milieux aqueux.
La première étape a donc consisté à optimiser l’immobilisation de l’enzyme sur les
électrodes ainsi que les protocoles de mesures de l’activité de la lipase. Par ailleurs, ces
mesures ont été réalisées en faisant varier un certain nombre de paramètres caractéristiques du
système étudié afin de mieux définir le rôle des différents éléments qui interviennent dans
l’élaboration de la partie réceptrice du capteur à savoir : L’effet de la température et l’effet du
pH du milieu. Ainsi nous avons montré que la membrane enzymatique qui contient la lipase
de Candida rugosa est sensible à la présence des pesticides organochlorés le diclofop méthyle. Nous avons également étudié la sélectivité de la détection de la substance cible en
présence d’interférents de quelques métaux lourds (Cadmium, Cobalt, Zinc et plomb) ainsi
que d’autre pesticide (Paraquat, Chlorothalonil et le Chlorpyriphos-éthyle (pesticide
organophosphoré)). Ces résultats nous ont permis de développer différents biocapteurs pour la
détection des pesticides (organochloré et organophosphoré).
Les techniques choisies (les impédances, la voltamétrie cyclique et la conductimétrie)
ont permis de conclure que le biocapteur élaboré présente des performances optimales tant du
point de vue sensibilité que stabilité et que la détection de polluant organique se fait par
l’hydrolyse de ce dernier par l’enzyme (la lipase de Candida rugosa).
Pour la détection de pesticide organochloré (le diclofop-méthyle) dans les milieux
aqueux ; une étude comparative des réponses de deux biocapteurs à base des enzymes
d’origine différents (la lipase de Candida rugosa (CRL) et la lipase de pancréas de porc
(LPP)) a été présentée.
L’intérêt d’un tel système est d’offrir un capteur de dimensions très réduites et de
mettre au point d’outils analytiques simples, capable de donner une information en temps
réels dans des domaines d’application variés